В отношении последних нами были представлены случаи применения метода пассивного нагружения лекарственных средств. Ниже приведено описание метода активного нагружения лекарственных средств. К методам активного липосомного нагружения лекарственных средств преимущественно относятся методы градиента pH и методы градиента сульфата аммония, этапы производственного процесса включают приготовление двойного фосфолипидного слоя, приготовление буферного раствора, приготовление ультрафильтрации, гомогенизацию или экструзию под высоким давлением, концентрирование ультрафильтрацией, приготовление раствора ненагруженных липосом, покрытие, фильтрацию и фасовку лекарственного средства. Активный метод введения лекарственного средства более сложен, чем пассивный, зависит от скорости инкапсулирования и количества вводимого лекарственного средства, гранулометрического состава, скорости утечки, высвобождения in vitro и in vivo испытаний лекарственных препаратов и т.д.

Типовой процесс активного нагружения лекарственного средства представляет из себя следующее:

Приготовляют ненагруженные липосомы методом катионного градиента, после чего удаляют органическую фазу при помощи системы ультрафильтрации. Раствор АФИ медленно добавляют к ненагруженным липосомам для покрытия лекарственного средства, после испытаний и фильтрации лекарственное средство отправляют на аппаратную фасовку.

1. Приготовление органической фазы

В емкость добавляют фосфолипиды и холестерин, затем добавляют органический растворитель в ограниченной среде, затем перемешивают для обеспечения растворения сырья.

2. Приготовление водной фазы

Точно взвешивают количество питательной воды в модуле навески, после питательной воды добавляют сырье сульфата аммония, перемешивают до растворения сырья, удаляют источник тепла подходящим методом, наконец, выдерживают соединение при определенной температуре (в системе ультрафильтрации или с применением адсорбции на активированном угле).

3. Приготовление исходных ненагруженных липосом

Приготовленную водную фазу и органическую фазу добавляют в смесительную емкость, перемешивают смесь в течение определенного времени в случае наличия контроля температуры емкости для получения липосомного сырья. Сырье гомогенизируют в гомогенизаторе высокого давления и многократно подвергают экструзии высокого давления, получают средний размер частиц путем отбора проб.

4. Приготовление буфера

Материал буфера точно взвешивают и добавляют к воде для инъекций, перемешивают и растворяют. После удаления источника тепла подходящим методом материал хранится при определенной температуре (с применением системы ультрафильтрации или адсорбции на активированном угле), при этом pH составляет приблизительно от 6,2 до 6,8.

5. Анализ тангенциального потока

Необходимо установить систему ультрафильтрации большой площади после емкости сырья ненагруженных липосом для регулирования параметров диализа мембранного комплекса системы ультрафильтрации (колонки ультрафильтрации), в результате чего после замены водной фазы на буфер можно получать ненагруженные липосомы (для отдельных серий или в рамках непрерывного процесса) в зависимости от технологии с определенным соотношением концентраций.

6. Нагружение липосом лекарственным средством

Добавляют точно взвешенное указанное количество основных ингредиентов лекарственного средства в воду для инъекций и получают раствор определенной концентрации (также доступен буферный раствор), затем добавляют раствор к ненагруженным липосомам для нагружения после стерилизации, выставляют определенную температуру и открывают смеситель на низкой скорости. После перемешивания буферный раствор можно добавить к липосомам для повышения скорости инкапсуляции препарата.

7. Аппаратная фасовка после фильтрации

Липосомы передаются в буферную емкость через фильтр с размером пор 0,45 мкм и 0,22 мкм. После приготовления, в ходе технологического процесса отбирают пробы для контроля стерильности липосом, после проверки продукцию передают в фасовочную машину для наполнения азотом для обеспечения автоматизма и стабильности фасовки и транспортирования.

На рисунке выше представлена производственная линия автоматической системы приготовления липосом для известной фармакологической компании (производства Tofflon), в состав которой входит модуль приготовления буферной соли, модуль удаления органической фазы, модуль системы ультрафильтрации, модуль гомогенизатора высокого давления / экструзии высокого давления, модуль концентрирования ультрафильтрацией. Данный проект в настоящее время находится на стадии производства.

Особенности системы приготовления раствора Tofflon в рамках данного проекта: